Es gibt verschiedene Möglichkeiten, die Anwesenheit von Mykoplasmen in einer kontaminierten Zellkultur nachzuweisen. Eine häufig verwendete aber unzuverlässige Methode ist die DAPI Färbung der Zellen mit anschließender mikroskopischer Analyse. Die sichersten Ergebnisse für die Routineuntersuchung liefern jedoch PCR-basierte Methoden. Biontex bietet mit <MycoSPY® und MycoSPY® Master Mix schnelle, zuverlässige und äußerst sensitive Kits für den PCR-basierten Mykoplasmennachweis in der Zellkultur an.

Der MycoSPY® Master Mix enthält alle notwendigen Bestandteile für die PCR Analyse. Jeder Mykoplasmen Test-Kit enthält zusätzlich zum Master Mix eine Interne Kontrolle und PCR geeignetes Wasser zum Rehydratisieren des lyophilisierten Master Mixes.

Wenn eine Kontamination mit Mykoplasmen in Ihrer Zellkultur nachgewiesen wurde, entfernt die hocheffektive Antibiotikamischung MycoRAZOR® Mykoplasmen schnell und effizient.

Arbeitsablauf

Der Master Mix mit integriertem Loading Buffer und Tracking-Farbstoffen erlaubt das denkbar einfachste Pipettierschema und das direkte Auftragen der PCR-Ansätze auf das Agarosegel:

Mehr als ein Viertel aller tierischen Zellkulturen sind mit Mykoplasmen / Mollicutes kontaminiert. Die am häufigsten in Zellkulturen gefundenen Stämme mit einer Wahrscheinlichkeit von insgesamt 94% sind: M. fermentans (47%), M. hyorhinis (19%), M. orale (10%), M. arginini (9%), A. laidlawii (6%) und M. hominis (3%). Darüber hinaus wurden folgende Stämme mit geringerer Wahrscheinlichkeit gefunden: M. gallisepticum, M. pneumoniae, M. salivarium, M. synoviae und S. citri. Alle diese Mollicute-Stämme werden neben einer Vielzahl anderer durch den MycoSPY® Master Mix nachgewiesen. Die Verifikation der Primerspezifität wurde per BLAST Analyse durchgeführt. Die folgende Liste zeigt nur Mollicute-Stämme mit 100% Primermatch.